L’électrophorèse est une technique utilisée en laboratoire pour séparer et purifier des molécules, généralement des protéines et des acides nucléiques. Elle est basée sur la mobilité des ions dans un milieu humide soumis à un gradient électrique.

Comme on peut le constater, les étapes nécessaires à la réalisation d’une électrophorèse sont relativement simples à suivre. Préparer la solution, préparer le support, placer l’échantillon, connecter les électrodes, alimenter le champ électrique et collecter les produits, telle est la séquence d’étapes nécessaires pour réaliser correctement une électrophorèse. Il s’agit d’une technique utile pour séparer et purifier différents composés en vue d’une analyse ultérieure.

Étapes nécessaires à la préparation et à la réalisation d’une électrophorèse

Étape 1 : Préparation de la solution

La première chose à faire pour réaliser une électrophorèse est de préparer une solution contenant les ions à séparer. Pour ce faire, on ajoute généralement un tampon adapté au type de molécule à séparer. Le pH du tampon doit être adéquat pour que les ions se séparent correctement dans les champs électriques. En outre, la concentration en ions doit être suffisante pour garantir que les composés se séparent aussi rapidement que souhaité.

Étape 2 : Préparation du pieu

Le pieu est le récipient dans lequel l’échantillon sera placé pour être soumis à l’électrophorèse. Selon le type d’électrophorèse à réaliser, le pieu peut être en verre, en verre ou en matrice polymère telle qu’un gel de polyacrylamide ou une membrane de nylon. Les piquets sont également préparés avec des tampons appropriés pour garantir une bonne performance de l’électrophorèse. 

Étape 3 : Placement de l’échantillon 

Une fois que le pieu est prêt, il faut déposer l’échantillon à l’intérieur. Cette procédure est souvent effectuée à l’aide de pipettes automatiques pour plus de précision. Si des types d’électrophorèse en réseau sont utilisés, comme dans les champs électriques, une petite goutte est déposée dans le coin central du réseau. Dans le cas d’une électrophorèse à courant continu, l’échantillon est inséré au bas du piquet. 

Étape 4 : Connecter les électrodes

Une fois l’échantillon déposé dans le récipient, les électrodes sont connectées aux extrémités du piquet. Les électrodes fournissent des quantités statiques de courant électrique pour générer le champ électrique entre les deux extrémités. Ces électrodes sont généralement fabriquées en polypropylène coagulé avec une seule couche pour éviter les fuites de courant.

Étape 5 : Alimentation du champ électrique

Enfin, une fois les électrodes correctement connectées au piquet, il faut les alimenter en courant électrique. Le champ électrique généré par le courant dans le pieu attire les ions de la solution vers les extrémités. Les ions sont séparés en fonction de leur taille et de leur charge. Cette opération peut être réalisée par une séance d’électrophorèse ou contrôlée par ordinateur.

Étape 6 : Collecte du produit

Lorsque la concentration d’ions aux pôles est atteinte, le courant est coupé et les produits sont collectés aux extrémités du piquet. Ces produits sont solubles et peuvent être dilués en vue d’une analyse et d’une quantification ultérieures.

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